尿液抗体检测在寄生虫病流行病学研究中的应

在对地区传染病的流行病学研究中，了解该区域的病原体特异性抗体水平非常关键。病原抗体通常是利用血液样本来检测，然而采血并不是一种便捷的操作，还有感染血液传播疾病的风险，难以让目标人群积极配合。而尿液样本通常也含有足够用于酶联免疫吸附试验(ELISA)的抗体，并且易于收集，没有感染风险，因此非常适合用于流行病学研究。尤其在寄生虫流行病学中，尿液抗体检测具有较高的敏感性和特异性。本文将分上下两篇和大家一起回顾已报道过的7种重要寄生虫病的尿液抗体检测方法，包括杜氏利什曼原虫(Leishmaniadonovani)、班氏丝虫(Wuchereriabancrofti)、日本血吸虫(Schistosomajaponum)、卫氏肺吸虫(Paragonimuswestermani)、细粒棘球绦虫(Echinococcusgranulosus)、多房棘球蚴（Echinococcusmultilocularis）、粪圆线虫（Strongyloidesstercoralis）和泰国肝吸虫（Opisthorchisviverrini），并综述尿液抗体检测的意义和前景。

1.1

抗体检测在流行病学研究中的作用

在寄生虫病的流行病学研究中，需要高灵敏度、高特异性、廉价及简单的方法，因此首选抗原和抗体检测。若抗原检测结果呈阳性表明寄生虫目前正在感染(活动性感染)，但是抗原检测对少量的寄生虫接触并不敏感。虽然感染寄生虫后需要过一周才可以检测抗体水平，也无法区分初次或是既往感染，但抗体检测灵敏度较高，可以捕捉到轻微的寄生虫暴露。甚至可以检出抗原检测呈阴性的寄生虫暴露，对流行病学研究非常有益。尿液中每种浓度的IgG,IgM,IgA和分泌性IgA都已有过报道。病原体特异性IgG(或其亚类)是浓度最高的抗体类，已有许多尿液ELISA方法可以将其检出。在一些报道中，IgA也被用来估计感染情况。也有研究人员尝试检测尿液中的特异性IgM抗体，但由于其含量过低没有成功。

1.2

利用尿液样本进行抗体检测的优点

尿液可以无创收集，容易得到居民配合。尿液的收集成本低，无需医疗耗材、专业医务人员，可以自行采集，或是在普通志愿者的帮助下进行。感染传染病(如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒或HIV-1)的风险大大降低。

2

尿液在寄生虫病抗体检测中的应用实例

2.1

内脏利什曼病

图1:杜氏利什曼原虫镜下图2:杜氏利什曼原虫病患犬内脏利什曼病，也被称为黑热病，是一种人畜共患的原虫病，通过白蛉吸血传播。这种原虫被人体内的巨噬细胞吞噬后在全身循环，在肝脏、脾脏和骨髓等器官中迅速繁殖。然后通过白蛉传递给新的宿主。感染后，经过几个月的潜伏期，会出现肝脾肿大、贫血和发热。如果不及时治疗，可至宿主死亡。由于不完全愈合，一些患者还会发生称为黑热病后皮肤利什曼病(PKDL)的皮肤损伤，这些患者也可能传染寄生虫。通常内脏利什曼病的诊断方法是检测骨髓、淋巴结和脾脏活检样本中的寄生虫。然而，这些方法侵入性过强，并且医院进行。临床已经将ELISA和直接凝集试验(DAT)作为补充检测方式。尿酶联免疫吸附试验对内脏利什曼病有较高的敏感性(95.0%)和特异性(95.3%)。采用尿酶联免疫吸附试验(ELISA)检测相关蛋白的重组抗原rKRP42，其敏感性(94.0%)和特异性(99.6%)。从利什曼原虫中提取的三种不同重组抗原用于尿液ELISA的比较均显示出高敏感性和特异性。

2.2

淋巴丝虫病

图3:丝虫生活史图4:淋巴丝虫病患者班氏丝虫和马来布鲁贾线虫是通过蚊子传播的寄生虫。成虫主要生活在淋巴管内，引起淋巴管炎、淋巴管停滞、阴囊水肿、乳糜尿和象皮病。这些成虫产生微丝蚴(mf)，进入血液。但mf一般白天积聚在肺部，夜间主要出现在外周血中，与病媒蚊吸血时间同步。虽然标准的诊断方法是检测外周血中的mf，但该方法不是很敏感，并且只能在夜间进行，很不方便。一种ICT试剂盒可检测血液中班氏丝虫的可溶性抗原，敏感性和特异性都很高，在白天亦可使用，已在世界范围内得到应用。不过它无法定量。即使是微弱的寄生虫暴露，抗体滴度也会增加，因此抗体检查适合于检测低流行地区人群的感染史。采用尿酶联免疫吸附试验(ELISA)检测该寄生虫对应抗原IgG4抗体，灵敏度为95.6%，特异性为99.0%。研究发现，即使在斯里兰卡的低流行地区，该方法也可用于评估控制丝虫病的用药方案。将班氏丝虫基因库中的重组抗原recWb-SXP1应用于尿液ELISA,mf阳性和ICT阳性的敏感性为96.8%，ICT阳性的敏感性为84.8%，特异性为%。

2.3

日本血吸虫病

图5:日本血吸虫生活史图6:日本血吸虫患者日本血吸虫是一种人畜共患吸虫，其尾蚴在死水地区经皮感染宿主。在人体内，尾蚴发育成血吸虫，进入血液，到达肝门静脉，在那里发育成成虫。卵在血管中产生，在肠和肝中形成栓子，其中一部分通过肠组织进入粪便。卵随粪便排到环境中，卵中的毛蚴在水中孵化并侵入贝类，贝类是中间宿主。在贝类体内，毛蚴发育为孢子囊，然后迁出贝类，感染人类。急性感染期会出现腹泻、腹痛、便血等症状；慢性感染期由于蠕虫卵在肝脏的栓塞会出现肝硬化和腹水积聚。从粪便中检出虫卵是诊断金标准，但灵敏度较低。血清寄生虫特异性抗体检测是补充检测方式。采用日本血吸虫可溶性虫卵抗原进行尿酶联免疫吸附试验(尿酶联免疫吸附试验)发现血清抗体阳性者中有86.8%的人尿酶联免疫吸附试验也呈阳性。

下期要点

1.尿液在寄生虫病抗体检测中的应用实例之肺吸虫病、包虫病、粪圆线虫病、后睾吸虫病。

2.尿酶联免疫吸附试验在哨点监测系统中的应用

3.全文结论

未完待续，下期再会。

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